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脂肪測定儀---糧油檢驗 植物油脂中縮水甘油脂肪酸酯的測定2

更新時間:2019-05-12      點擊次數(shù):2070

 3.2.2 樣品測定

  液相色譜條件

  色譜柱:反相色譜柱(4.6 mm×150 mm,5μm)或相當(dāng)型號色譜柱。柱溫:40oC。進(jìn)樣量:20μL。流動相:A為甲醇/水(92:8,v/v),B為異丙醇。流動相洗脫程序:0-18.0 min,0%B(流速為1mL/min);18.1-32.0min,100%B(流速為0.5mL/min);32.1-42.0min,0%B(流速為1mL/min)。

  質(zhì)譜條件

  離子源:APCI源。噴霧器溫度:500oC。干燥氣溫度:350oC。鞘氣壓力:50arb。輔助氣壓力:2rb。電暈電流:8μA。選擇性離子監(jiān)測(SIM):C16:0-GE為m/z 313.3,C18:0-GE為m/z 341.2,C18:1-GE為m/z 339.4,C18:2-GE為m/z 337.3,C18:3-GE為m/z 335.3。

  根據(jù)縮水甘油脂肪酸酯工作溶液的濃度及其峰面積,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

  3.2.3 方法學(xué)驗證

  3.2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線及相關(guān)系數(shù)

  以標(biāo)準(zhǔn)工作液濃度(c)為橫坐標(biāo),峰面積(A)為縱坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線并計算相關(guān)系數(shù),結(jié)果如表1所示。

  表1 縮水甘油脂肪酸酯的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程及相關(guān)系數(shù)

  縮水甘油酯

  

 

  線性范圍(ng/mL)

  

 

  標(biāo)準(zhǔn)曲線方程

  

 

  R2

  

 

  C16:0-GE

  

 

  5~200

  

 

  y=241614x-208371

  

 

  0.9999

  

 

  C18:0-GE

  

 

  5~200

  

 

  y=124722x-76195.4

  

 

  0.9997

  

 

  C18:1-GE

  

 

  10~400

  

 

  y=268901x-1295670

  

 

  0.9994

  

 

  C18:2-GE

  

 

  10~400

  

 

  y=217331x-559031

  

 

  0.9999

  

 

  C18:3-GE

  

 

  5~200

  

 

  y=138762x-173831

  

 

  0.9996

  

 

  3.2.3.2 方法回收率及精密度實驗

  

  取GE含量都低于低檢出限的樣品作為基質(zhì),稱取1.00g,加入100μL C16:0-GE、C18:0-GE、C18:3-GE濃度為100ng/mL同時C18:1-GE、C18:2-GE濃度為200ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)混合溶液,按照前述方法處理和分析樣品,計算回收率(如表2所示),平均加標(biāo)回收率為96.25%~106.18%,RSD為2.87%~5.32%,回收率和精密度都能滿足分析要求。

  表2 加標(biāo)回收率和精密度試驗結(jié)果(n=3)

  

  

 

  C16:0-GE

  

 

  C18:0-GE

  

 

  C18:1-GE

  

 

  C18:2-GE

  

 

  C18:3-GE

  

 

  1

  

 

  109.20

  

 

  105.10

  

 

  101.28

  

 

  101.84

  

 

  103.10

  

 

  2

  

 

  103.11

  

 

  96.52

  

 

  95.06

  

 

  93.36

  

 

  93.20

  

 

  3

  

 

  106.23

  

 

  104.15

  

 

  92.42

  

 

  94.57

  

 

  101.30

  

 

  平均回收率(%)

  

 

  106.18

  

 

  101.92

  

 

  96.25

  

 

  96.59

  

 

  99.20

  

 

  RSD(%)

  

 

  2.87

  

 

  4.61

  

 

  4.73

  

 

  4.75

  

 

  5.32

  

 

  在AOCS標(biāo)準(zhǔn)方法的比對驗證實驗中,共有25家實驗室參加、且均提交兩組平行實驗結(jié)果,取平均值后與我們提交的結(jié)果對比見表3。結(jié)果顯示,本實驗室的檢驗結(jié)果與比對檢測結(jié)果平均值非常接近。

  表3檢測結(jié)果對比

  

 

  

  

 

  C16:0-GE

  

 

  C18:0-GE

  

 

  C18:1-GE

  

 

  C18:2-GE

  

 

  C18:3-GE

  

 

  總含量

  

 

  樣品1

  

 

  檢測結(jié)果

  

 

  5.62

  

 

  4.64

  

 

  5.95

  

 

  5.69

  

 

  5.52

  

 

  27.42

  

 

  平均值

  

 

  5.32

  

 

  5.01

  

 

  5.94

  

 

  5.78

  

 

  5.86

  

 

  27.96

  

 

  樣品2

  

 

  檢測結(jié)果

  

 

  N.D

  

 

  N.D

  

 

  N.D

  

 

  N.D

  

 

  N.D

  

 

  N.D

  

 

  平均值

  

 

  N.D

  

 

  N.D

  

 

  N.D

  

 

  N.D

  

 

  N.D

  

 

  N.D

  

 

  樣品3

  

 

  檢測結(jié)果

  

 

  2.50

  

 

  0.44

  

 

  5.64

  

 

  1.43

  

 

  N.D

  

 

  10.00

  

 

  平均值

  

 

  2.72

  

 

  0.36

  

 

  6.08

  

 

  1.68

  

 

  N.D

  

 

  10.85

  

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